打开水浴锅，温度62℃（水浴箱内确保有足够的水量）；

工作液配制 ：干净的试管加入200ul硝酸银溶液和3ml六次甲基四胺溶液，充分混匀，然后加至硼砂溶液中混合成工作液（这个步骤的配制顺序很关键，必须按顺序配制，这也是我们前期染片效果不好总结出来的经验教训）。如肉眼见少许透明颗粒属正常现象，无需过滤。（一份工作液8.2ml，可染8张片。配置好的工作液若不能及时用完，需避光保存放置2-8℃冰箱，并限一个月使用完。加热后的工作液只限使用一次）；

挑取标本制成涂片，自然干燥后加热固定；

滴加高碘酸溶液氧化15min，蒸馏水冲洗；

将玻片放入染色玻片盒内，加1ml的工作液，将染色盒置于水浴锅中使染色盒漂浮于水面上，盖上盖子。常见的真菌染色10-15min，肺孢子菌染20-25min，见标本有黄棕色反应后，取出，（注意：工作液不能接触到金属离子，请确保水浴箱的温度到达62℃，且染色过程中切勿使染液干涸，染色过程中，可显微镜下观察，如果着色不够深，可延长染色时间或再重复此步骤）；

玻片取出待冷却后流水冲洗；

滴硫代硫酸钠溶液处理3min，流水冲洗；

用亮绿染液复染1min，流水冲洗，待干镜检。